Modulación de la actividad de las fosfolipasas C y D por calcitriol en músculo esquelético de rata : efectos del envejecimiento

María Marta Facchinetti.

1998.

145 h. : ilustraciones ; 30 cm.

Tesis Doctor en Bioquímica.

Director de tesis: Ana J. Russo de Boland.

Tesis (doctoral)--Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia, 1998.

Resumen: En este trabajo de Tesis se estudió el mecanismo de acción no genómico del derivado hormonalmente activo de la vitamina D3, el 1 alfa,25-dihidroxivitamina D3 ó calcitriol en músculo esquelético de ratas jóvenes (3 meses) y seniles (24 meses). En ambos grupos de animales la hormona estimula la hidrólisis de polifosfoinosítidos por la fosfolipasa C (PI-PLC) generando los segundos mensajeros diacilglicerol (DAG) e inositoltrifostato (IP3) estando esta respuesta significativamente disminuída en los animales seniles. La formación de DAG es bifásica, siendo la fase tardía independiente de la hidrólisis de fosfoinosítidos por la PI-PLC y generada de la hidrólisis de fosfatidilcolina (PC) por acción de la fosfolipasa D (PLD) en las ratas jóvenes y por acción de la fosfolipasa C (PC-PLC) en los animales seniles. La activación de las fosfolipasas C y D en músculo esquelético de rata está mediada por una proteína G sensible a toxina pertussis. Con el envejecimiento el acoplamiento de la proteína G (Gi/Go) a la PI-PLC estaría alterado. La activación de PLD por calcitriol es además dependiente de la proteína quinasa C (PKC) y de calcio extracelular Como consecuencia de la formación de DAG, el calcitriol activa en músculo esquelético a la PKC, traslocándola del citosol a la fracción particulada. Las isoformas que se translocan a membrana son las PKCs alfa y beta y la isoforma epsilon sufre traslocación reversa (de membrana a citosol). Con el envejecimiento la translocación resulta afectada conservando los animales seniles la translocación de la isoforma beta y en mucho menor grado que los animales jóvenes. Además se demostró que el calcitriol activa la fosforilación de dos proteínas de 82 y 55 kDa, estando este mecanismo alterado en músculo de animales seniles. Los resultados presentados demuestran que en músculo esquelético de rata el calcitriol estimula la actividad de las fosfolipasas C y D a través de un mecanismo dependiente de proteínas G, de PKC y de la presencia de calcio extracelular y que este efecto se encuentra alterado como consecuencia del envejecimiento celular. Los estudios realizados presentan un aporte original al conocimiento del mecanismo de acción no genómico del calcitriol en músculo esquelético y cómo resulta afectado por el envejecimiento celular, contribuyendo de esta manera al entendimiento de las bases moleculares de las miopatías vitamina D-dependientes observadas en la vejez. CALIFICACION DEPARTAMENTO DE GRADUADOS Calificación de la defensa oral:Sobresaliente - (10) Fecha:14/8/98

Incluye referencias bibliográficas (p. 119-145).