Microentorno lipídico del receptor de acetilcolina nicotínico

Silvia Susana Antollini.

1998.

xii, 139 h. : ilustraciones ; 30 cm.

"Tesis Doctor en Bioquímica".

Director de tesis: Fransisco José Barrantes.

Tesis (doctoral)--Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia, 1998.

Resumen: La funcionalidad del AChR, proteína integral de membrana, está influenciada por el entorno lipídico en que se encuentra. Se han visto alteraciones de su actividad iónica, por ejemplo, por la ausencia de colesterol o la presencia de ácidos grasos libres, sin embargo no se ha podido discernir el mecanismo por el cual éstos, y otros lípidos, modulan la funcionalidad del AChR. Se ha infromado, además, que distintos compuestos hidrofóbicos actúan inhibiendo el flujo iónico de la proteína receptora, y que la acción de ellos se llevaría a cabo a través de la membrana lipídica. El objetivo de esta Tesis fue estudiar las características físicas de los lípidos de las membranas nativas en las que está inserto el AChR, y en particular las de los lípidos que rodean a la proteína, y las modificaciones de las mismas por la partición en ellos de lípidos exógenos. Para ello se utilizaron membranas ricas en AchR de T. marmorata (que permitieron el estudio de las características físicas de los lípidos más cercanos a la proteína, y su comparación con las características del resto de los lípidos), y líneas celulares que expresan al AChR, adulto o fetal, en su superficie (en las que se estudiaron las características físicas promedio de las membranas y se compararon con la actividad iónica del AChR inserto en ellas). Se realizaron estudios de polarización generalizada con la sonda Laurdan y de anisotropía de fluorescencia con las sondas DPH, TMA-DPH y PA-DPH. Diferentes evidencias experimentales permitieron afirmar que el Trp (aminoácido fluorescente que se encuentra en el AchR) y la sonda Laurdan incorporada a las membrans ricas en AchR de T. marmorata conforman un buen par para realizar experimentos de transferencia de energía desde las moléculas de Trp excitadas (donantes) a las moléculas de Laurdan (aceptores). Esta herramienta experimental, debidamente puesta a punto, se utilizó para estudiar las características físicas de únicamente los lípidos que rodean al AchR; y para estudiar la relación de determinados lípidos exógenos particionados en la membrana con el AchR, mediante el desplazamiento de las moléculas de Laurdan del microentorno lipídico de la proteína, puesto en evidencia por una disminución en la eficiencia del proceso de transferencia de energía. CALIFICACION DEPARTAMENTO DE GRADUADOS Calificación de la defensa oral: Sobresaliente - 10 (diez) Fecha: 29/12/98

Incluye referencias bibliográficas (p. 116-139).