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$a Los movimientos estomáticos son esenciales para el entendimiento del déficit hídrico y la regulación de la asimilación de carbono en las plantas ya que son responsables de controlar el 95 del intercambio gaseoso entre los tejidos y el medio ambiente. Con la intención de estudiar los mecanismos de transporte iónico en las células estomáticas se llevó a cabo la presente Tesis. El Primer Capítulo consiste en la introducción general al sistema, y los siguientes intentaron contestar algunos de los interrogantes relacionados con los flujos iónicos. El Segundo Capítulo estudia al estoma en tiras epidérmicas de cotiledones de cebolla (Allium cepa) como sistema complejo, con la finalidad de observar cómo cambia su contenido en K+ durante un ciclo de iluminación completo. Utilizando la técnica de tinción para K+ con cobaltonitrito de sodio, se siguieron los cambios del K+ acumulado correlacionándolos con mediciones de apertura estomática. Se halló que la apertura de los estomas está perfectamente correlacionada con la acumulación de K+. En la segunda mitad del ciclo lumínico, sin embargo, a pesar del mantenimiento de la apertura estomática se evidenció una caída en el contenido de K+ intracelular y una marcada falta de correlación con la apertura. De ello surge que debe encontrarse otro contribuyente osmóticamente activo. Los resultados obtenidos permiten postular a la sacarosa como el posible candidato. En el Tercer Capítulo se estudia a la célula estomática aislada. Se emplean protoplastos para activar la extrusión de H+, mecanismo que permite la entrada de K+ a la célula estomática. Se halló que el aumento en el volumen de los protoplastos de Vicia faba producido en presencia de luz azul es inhibido por vanadato (un inhibidor de las H+ -ATPasas) suministrado en una solución con baja concentración de CI. El vanadato también inhibe el incremento de volumen que se produce al estimular la H+ -ATPasa con el agonista fusicoccina. La Inhibición de la respuesta a la luz azul implicaría a una H+ -ATPasa como uno de los componentes del mecanismo de transducción sensorial de la luz azul en células estomáticas. En el Cuarto Capítulo se estudia al tonoplasto de una célula estomática caracterizando electrofisiológicamente los canales presentes. Para ello, se desarrolla una técnica de aislamiento de protoplastos, y a partir de ellos, de las vacuolas. Se halló que el canal predominante en el tonoplasto (210±17pS) presenta una probabilidad de apertura dependiente de voltaje y que es principalmente catiónico (Na+>K+>Rb+>Cs+). El canal tiene lenta cinética de activación y de desactivación. Debido a su selectividad catiónica, el canal caracterizado permitiría el flujo iónico de K+ entre la vacuola y el citoplasma. Se describen las condiciones fisiológicas de apertura del mismo. Calificación de la defensa oral: Sobresaliente-10(diez) Fecha: 27/12/94. |
